超低溫保存已在許多種植物的不同材料上得到成功的應(yīng)用,并被認(rèn)為是較為安全有效的植物種質(zhì)資源長(zhǎng)期保存方法。
液氮罐
超低溫保存是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程,除了保存技術(shù)本身外,一些因素如材料的選擇及細(xì)胞生理狀態(tài)的調(diào)控等也直接影響著保存后細(xì)胞的存活與再生。
主要特點(diǎn):采用各種處理手段(緩慢降溫、低溫保護(hù)劑脫水、直接干燥等)盡可能地除去或替代細(xì)胞中的可冰凍水(自由水),從而在降溫/升溫過(guò)程中避免或抑制冰晶的形成和生長(zhǎng),實(shí)現(xiàn)玻璃態(tài)固化。
注意事項(xiàng)
超低溫保存是一個(gè)較為復(fù)雜的過(guò)程,各種脫水處理以及溫度的劇烈變化本身除可造成致死性的傷害外,也會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞產(chǎn)生一些非致死性生理生化變化,如膜系統(tǒng)流動(dòng)性和透性的改變、蛋白構(gòu)象和功能的改變以及一些代謝過(guò)程的解耦連等。這些變化可以引起細(xì)胞膜系統(tǒng)以及酶蛋白功能的損傷和自由基的產(chǎn)生等,若細(xì)胞的修復(fù)功能無(wú)法保護(hù)細(xì)胞恢復(fù)正常生理功能,將引起細(xì)胞死亡。因此在植物種質(zhì)資源超低溫保存研究中,除了認(rèn)識(shí)到保存技術(shù)的重要性之外,如材料的選擇、細(xì)胞生理狀態(tài)的調(diào)控及其與低溫和脫水耐性之間的關(guān)系等機(jī)理也需進(jìn)行深入的研究。
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