細(xì)胞培養(yǎng)的一般過程,主要包括準(zhǔn)備、取材、培養(yǎng)和凍存復(fù)蘇4步。為保存細(xì)胞,特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株,要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般用一196℃液氮溫度,將細(xì)胞收集至凍存管中加入含保護(hù)劑(一般為二甲基亞砜或gan油)的培養(yǎng)基,以一定的冷卻速度凍存,*終保存于液氮中。在極低的溫度下,細(xì)胞保存的時間幾乎是無限的。
液氮罐
目前美國標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞庫或細(xì)胞銀行(ATCC)液氮凍存有3200個已經(jīng)過鑒定的細(xì)胞系(1992),其中包括來自正常人和各種疾病患者的皮膚成纖維細(xì)胞系和來自不同物種的近75個雜交瘤細(xì)胞株。
液氮罐