給您 介紹一下細(xì)胞培養(yǎng)所用到的設(shè)備,而其中
液氮罐也是屬于其中的一個(gè)重要設(shè)備?! ?br />
一、培養(yǎng)設(shè)備
1. 無(wú)菌室:為相對(duì)密封、防塵、防菌的空間。一般由更衣間、緩沖間和操作間組成(P29)。使用前紫外照射1-2h,每周甲醛、乳酸或過(guò)氧乙酸熏蒸2h和每月新潔爾滅檫拭地面和墻壁一次。
2. 超凈工作臺(tái):為無(wú)菌操作裝置,有測(cè)流、外流和直流式三種。使用前紫外照射10-30min,使用后70%酒精檫拭臺(tái)面,定期福爾馬林熏蒸。
3. CO2培養(yǎng)箱:用于培養(yǎng)細(xì)胞。按要求恒定供給CO2(5%)、保持穩(wěn)定的溫度(37℃)、pH值(7.2-7.4)和飽和濕度(95%)。
二、細(xì)胞觀察與計(jì)數(shù)設(shè)備
1. 倒置顯微鏡:定期檢查細(xì)胞生長(zhǎng)情況。
2. 細(xì)胞計(jì)數(shù)板和電子細(xì)胞計(jì)數(shù)儀:用于計(jì)算細(xì)胞數(shù)目。
三、細(xì)胞保存設(shè)備
液氮生物容器:俗稱液氮罐,標(biāo)準(zhǔn)大氣壓下其內(nèi)溫度可低至—190℃,適用于細(xì)胞、組織的長(zhǎng)期凍存。罐口不密封,要定期加注液氮,加液氮和取材料時(shí)要注意保護(hù)好眼睛和手腳。
四、消毒滅菌相關(guān)設(shè)備
1. 壓力蒸汽消毒器:可殺滅包括芽胞在內(nèi)的所有微生物,是滅菌效果**、應(yīng)用最廣的滅菌方法。方法是將需滅菌的物品放在高壓鍋內(nèi)(物件不宜過(guò)多),加熱時(shí)蒸汽不外溢,高壓鍋內(nèi)溫度隨著蒸汽壓的增加而升高。在103.4kPa蒸汽壓下,溫度達(dá)到121.3℃,維持15~20分鐘可達(dá)滅菌目的。適用于普通培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)器械、玻璃容器及注射器、敷料等物品的滅菌。使用時(shí)要注意鍋內(nèi)的水位,取物時(shí)要檢查壓力是否為零。
2. 無(wú)菌過(guò)濾器:為除菌設(shè)備,分反復(fù)適用型和一次性過(guò)濾器,使用時(shí)一般用微孔直徑0.22μm的濾膜。
3. 酸缸:用于去除玻璃器皿壁上的污物。缸內(nèi)的清潔液(具強(qiáng)腐蝕性,加取物件時(shí)需戴膠手套穿長(zhǎng)袖工作衣)的配置:稱取一定量的重鉻酸鉀,于干燥研缽中研細(xì),將此細(xì)粉加入盛有適量水的玻璃容器內(nèi),加熱,攪拌使溶解,待冷后,將此玻璃容器放在冷水浴中,緩慢將濃硫酸斷續(xù)加入,不斷攪拌,勿使溫度過(guò)高,容器內(nèi)容物顏色漸變深,并注意冷卻,直至加完混勻。
4. 電熱恒溫干燥箱:用于烘干和干熱消毒玻璃器皿。注意烘烤物件時(shí)一般溫度不能超過(guò)60℃,烘干后要及時(shí)轉(zhuǎn)移物件。
五、移液設(shè)備
1. 微量移液器(俗稱“槍”)及槍尖:微量移液器分多通道和單通道,單通道常用的規(guī)格有0.5-10µl、5-100µl、20-300µl、50-1000µl 和100-5000µl。槍尖有藍(lán)色(1ml)、黃色(200µl)和白色(20µl)三種。
2. 玻璃移液器與洗耳球、細(xì)胞吹打管與膠塞。
六、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)相關(guān)其他設(shè)備
1. 流式細(xì)胞儀:在功能水平上對(duì)單細(xì)胞進(jìn)行定量分析和分選的檢測(cè)手段,它可以高速分析上萬(wàn)個(gè)細(xì)胞,并能同時(shí)從一個(gè)細(xì)胞中測(cè)得多個(gè)參數(shù),與傳統(tǒng)的熒光鏡檢查相比,具有速度快、精度高、準(zhǔn)確性好等優(yōu)點(diǎn),成為當(dāng)代最先進(jìn)的細(xì)胞定量分析技術(shù)。
2. 多功能酶標(biāo)儀:用于檢測(cè)溶液的吸光度值。其本質(zhì)就是一臺(tái)變相的專用光電比色計(jì)或分光光度計(jì),基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計(jì)基本相同。分為單通道和多通道2種類型。
3. 離心機(jī)及離心管:用于分離、傳代和處理細(xì)胞,轉(zhuǎn)速通常在500-5000rpm,離心體積為0.5-50ml不等。
4. 純水蒸餾器:分蒸餾式和過(guò)濾式。
5. 超聲波清洗機(jī):對(duì)精密工件上的空穴、狹縫、凹槽、微孔、暗洞等處,通常的洗刷方法難以見(jiàn)效,使用超聲清洗卻可以達(dá)到良好的效果。對(duì)質(zhì)地較硬、聲反射強(qiáng)的材料清洗效果較好(如金屬、玻璃、陶瓷、塑料)。
七、常用培養(yǎng)器皿
1. 玻璃瓶:分配翻蓋膠塞的鹽水瓶和配塑料螺旋蓋的盛液瓶。規(guī)格有500ml、250ml、100ml和50ml。
2. 培養(yǎng)瓶:主要用于培養(yǎng)細(xì)胞。常用的規(guī)格有15ml、25ml、75ml、100ml、200ml、275ml、500ml和1000ml等。
3. 培養(yǎng)皿:按直徑分30ml、60 ml、100 ml、150 ml和300 ml。
4. 培養(yǎng)板:根據(jù)孔數(shù)分6孔(底面積為9.6cm2、加培養(yǎng)液為2.5ml)、12孔(底面積為4.5cm2、
加培養(yǎng)液為2.0ml)、24孔(底面積為2cm2、加培養(yǎng)液為1.0ml)和96孔(底面積為0.32cm2、加培
養(yǎng)液為0.1ml)。
液氮罐